Cecilia  Poderoso(1),  Alejandra B. Gorostizaga(1),  Fabiana  Cornejo Maciel(1), 

      Cristina  Paz(1),  Ernesto J. Podestá(1).

      (1)Departamento de Bioquímica Humana. Facultad de Medicina. UBA

      mailto:gacela66@hotmail.com

Previamente demostramos que el grado de fosforilación de proteínas en tirosina en células

esteroidogénicas es dependiente de la acción hormonal mediante la modulación de la actividad de

proteína tirosina fosfatasas.

El objetivo de este trabajo fue analizar la actividad diferencial de dos serina/treonina fosfatasas

PP1 y PP2A durante la estimulación aguda de la esteroidogénesis (5-60 min) por AMPc en células

de Leydig de la línea MA-10. La actividad enzimática de PP1 y PP2A expresada como nmoles

de fosfato liberados/min.mg de proteína fue discriminada mediante la utilización de ácido okadaico,

un inhibidor con mayor IC50 para PP1 que para PP2A. El 8BrAMPc no modificó la actividad de

PP1 (Control: 5 min: 1,23 ± 0,02; 15 min: 1,25 ± 0,03; 30 min: 1,30 ± 0,05; 60 min: 1,28 ± 0,07;

8BrAMPc: 5 min: 1,53 ± 0,19; 15 min: 1,61 ± 0,52; 30 min: 1,56 ± 0,24; 60 min: 1,59 ± 0,07).

En cambio, la actividad de PP2A disminuyó a tiempos cortos de estimulación respecto del control

(5 y 15 min) y luego (30 y 60 min) se normalizó: control: 5 min: 2,67 ± 0,14; 15 min: 2,8 ± 0,1; 30

min: 2,4 ± 0,1; 60 min: 2,59 ± 0,09; 8BrAMPc: 5 min: 1,4 ± 0,6 (P<0,01); 15 min: 1,77 ± 0,52

(P<0,05); 30 min: 2,01 ± 0,29; 60 min: 3,1 ± 0,3).

La inmunoprecipitación de la PP2A y posterior Western-blot reveló la presencia de fosfoserina y

ausencia de fosfotirosina.

Los resultados sugieren que en células de Leydig además de la estimulación de tirosina fosfatasas

existe una modulación de la actividad de PP2A vía PKA.