Fernando A. Martín(1),  Virginia  Pistone Creydt(1),  Elsa  Zotta(1),  Cristina  Ibarra(1).

      (1)Lab. de Fisiopatogenia, Dpto. de Fisiología, Fac. de Medicina, UBA

      ibarra@fmed.uba.ar

El objetivo del presente trabajo fue evaluar la acción citotóxica de la subunidad B de la toxina Shiga tipo 2 (Stx2) sobre la funcionalidad y morfología del colon de rata in vitro. En el tejido montado en una cámara modificada de Ussing se midieron el flujo neto de agua y la corriente de cortocircuito antes y después del agregado de 200 µl de sobrenadantes de cultivo de E. coli recombinantes que expresan Stx2 completa o mutada.

El dosaje de la actividad citotóxica sobre células Vero mostró que el sobrenadante de E. coli que expresa Stx2 completa tuvo una actividad similar a la observada en la cepa salvaje. En cambio, los sobrenadantes de E. coli que expresan Stx2 mutada no tuvieron actividad ciotóxica. En colon de rata se observó que todos los sobrenadantes de cultivos presentan una inhibición significativa del Jw sin modificar los parámetros eléctricos.

Esta acción fue comparable a la hallada con Stx2 pura a una concentración de 0,7 ng/ml y podría ser atribuída a un efecto directo de la subunidad B sobre los mecanismos que regulan el transporte intestinal de agua. El epitelio colónico incubado con sobrenadante de E. coli conteniendo Stx2 mutada mostró una destrucción de la superficie epitelial similar a la observada con Stx2 pura. Además produjo una hiperplasia folicular con proliferación de mononucleares hacia la mucosa intestinal. En conclusión, la subunidad B parece tener acción tóxica per se independiente de la presencia de la subunidad A.